拒绝TEWL无效测试！经皮水分流失测量仪校准全攻略：必要性与实操指南

经皮水分流失（Transepidermal Water Loss, 简称TEWL）是体外透皮试验（IVPT）皮肤屏障完整性评价（Skin Barrier Integrity Test）和化妆品功效评价中，衡量皮肤屏障功能的关键指标。今天，我们就来深度拆解：经皮水分流失测量仪为什么要校准？到底能不能在实验室自己校准？以及具体的校准流程是什么？建议先收藏，再阅读！

一、为什么经皮水分流失测量仪必须定期校准？

1. 传感器自然漂移

经皮水分流失TEWL测量的物理本质，是量化皮肤表面微弱的水汽蒸发通量。这意味着探头内部的温湿度传感器对测试环境的微气流、温度和湿度变化必须非常敏感。随着设备使用时长的增加，传感器不可避免地会发生老化或附着微尘，从而导致数据漂移（Data Drift）。未经校准的仪器，数值偏高或偏低、波动大，其测量结果无法反映皮肤样本真实的屏障状态。反复重测验证，大量耗费样本、试剂、人力，不可避免的延长项目研发周期。

2.       确保离体皮肤屏障完整性数据的有效性与合规性

根据美国FDA在2022年10月发布的《In Vitro Permeation Test Studies for Topical Drug Products Submitted in ANDAs Guidance for Industry》行业指南草案指出：经皮水分流失测量仪需进行合理校准（由制造商完成，部分设备还需在每组试验开始前再次校准）。申报方可提供所用特定经皮水分流失测量仪对应的制造商规定相关校准流程资料，该资料可与体外透皮试验方法开发报告一同随同仿制药申请提交，用以佐证实验室制定的经皮水分流失测量相关技术流程具备合理性。

药品研发本质就是数据驱动研发，数据真实、准确，是药品上市销售、安全落地的根本保障。缺乏标准校准程序的低端经皮水分流失测量仪，其输出的测试数据不具备溯源性和可重复性。定期校准是确保跨批次、跨周期实验数据具有可比性（Comparability）和重现性（Reproducibility）的重要途径，也是应对行业监管抽查、发表高水平学术论文（SCI）的基础保障。

二、       TEWL校准真的很难操作吗？

很多人认为这种冷门仪器只能返厂到国外校准，甚至认为经皮水分流失测量仪目前没有校准方法。事实并非如此，TEWL校准在当下是可行且高效的。

成熟的校准规范：目前国际上针对微环境温湿度传感器已有成熟的标准规范（如NPL）。

多元的校准途径：

原厂校准：大多数主流经皮水分流失测量仪品牌（如ASCH，Courage+Khazaka等）在国内均设有售后服务中心，提供标准校准服务。

日常定期校准套件：部分经皮失水仪(如Biox Aquaflux)配备了基于“超微量纯水液滴法"方法的校准工具，实验室人员可通过标准操作规程进行日常校准。

采用1 μl超微量纯水测得的水汽蒸发量时间序列校准曲线，将曲线下方面积与纯水蒸发量建立等量对应关系。从校准曲线中可以看出两种不同原理（封闭腔冷凝室和开放腔）经皮水分流失测量仪测得的曲线面积相近，因此二者的校准结果也十分接近。开放腔室信号出现波动，是由实验室空调周期性启停运作所导致。

三、经皮水分流失测量仪标准化校准操作指南

先进的经皮水分流失测量仪通常有科学且具有操作性的日常校准规程。以Biox Aquaflux台式经皮水分流失测量仪为例，标准的定期实验室校准（Calibration）通常包含以下三个步骤：

步骤一：环境静置与热平衡（Environmental Equilibration）

1. 将TEWL经皮水分流失测量仪放置于符合标准的恒温恒湿实验室中（推荐温度20-22℃，相对湿度40-60%）。

2. 开机预热30分钟左右，确保探头内的传感器充分适应环境，达到稳定的热平衡状态。

步骤二：标准源标定（Standard Source Calibration）

1.       零点校准（Zero Calibration）：使用Aquaflux配备的“零点校准帽"，确保仪器在无水汽蒸发状态下的读数精准归零。

2. 高点校准（High-point Calibration）： 用校准套件中配备的超微量注射器取0.5μl实验室超纯水，将其注入专用校准帽中，模拟皮肤水分流失，将校准帽拧紧，点击开始校准。

步骤三：校准系数确认（Factor Adjust）

校准帽中的微量水开始挥发直到水分流失完毕，软件算法将软件自动计算出新的校准系数(Calibration Factor)，如下图所示新的校准系数为0.6764。

熟练掌握该SOP，整个校准流程仅需30-60分钟，即可有效避免经皮水分流失测量仪长时间使用过程中产生的数据漂移，满足IVPT试验的合规性要求。

四、结语

经皮水分流失测量仪的校准绝非可有可无的走过场，而是构筑IVPT体外透皮试验合规性，严谨性的重要环节。及时且正确地对经皮水分流失测量仪开展校准工作，是符合国内外经皮给药研究指南、实验室质量管理体系及保障测量结果可信的关键举措。实验室管理者在采购经皮失水仪时，应将“是否具备标准校准套件与方法"作为URS关键考量要求。定期校准经皮水分流失测量仪，是对每一个皮肤样本屏障完整性实验数据可靠性的基本保证。

(大家实验室的经皮水分流失测量仪多久校准一次呢？在皮肤屏障测试中遇到过哪些“数据玄学"？欢迎在评论区留言讨论！或联系我们关于经皮水分流失测量仪校准服务详情。)