利用IITC MRBP鼠尾血压测量仪探究莱菔子水煎液的降压作用及代谢机制

山东中医药大学实验中心高世杰团队在《时珍国医国药》2022年第33卷第4期发表研究，采用粪便代谢组学方法考察莱菔子水煎液对自发性高血压大鼠的降血压作用及粪便代谢物影响，分析相关代谢通路，为莱菔子降压机制提供实验依据。

摘要

目的：探讨莱菔子水煎液对自发性高血压大鼠（SHR）的降压作用及其对SHR粪便代谢物的影响，分析特征代谢物可能涉及的代谢通路，为探索莱菔子降压机制提供实验依据。

方法：选用8周龄雄性SHR，随机分为模型组和莱菔子水煎液组，以8周龄雄性Wistar-Kyoto（WKY）大鼠为对照，灌胃6周后采集大鼠粪便，采用液相色谱-质谱法采集粪便代谢物数据，利用SIMCA-P14.0、MetaboAnalyst4.0等软件进行数据分析。

结果：莱菔子水煎液对SHR有明显降压作用（P<0.05），并调节粪便中亚油酸、尿香草苦杏仁酸、鹅去氧胆酸等代谢物水平，相关代谢通路包括亚油酸代谢通路、苯丙氨酸代谢通路、卟啉与叶绿素代谢通路、花生四烯酸代谢通路等。

结论：莱菔子水煎液具有确切的降压作用，可改变SHR内源性代谢物。

材料与仪器

实验动物

8周龄雄性SHR大鼠14只，体质量（200±20）g；8周龄雄性SPF级WKY大鼠7只，体质量（200±20）g

实验药材

莱菔子，经鉴定为十字花科植物萝卜的干燥成熟种子

实验仪器

屹立高速粉碎机、旋转蒸发器（YRE-501型）、IITC MRBP 10通道大小鼠尾血压测量仪、冷冻离心机、53050型真空浓缩仪、超声波清洗器、UltiMate 3000超高效液相色谱仪

IITC MRBP鼠尾血压测量仪

实验试剂

乙腈、甲醇（纯度≥99.9%）、甲酸（LC-MS级）、2-氯苯丙氨酸（纯度≥98.5%）、甲酸铵（纯度≥99.9%）、超纯水

实验过程

动物分组：14只SHR适应性饲养1周后，随机分为莱菔子水煎液组和模型组，每组7只；7只WKY大鼠作为对照组。

莱菔子水煎液制备：莱菔子粉碎至50目，称取180g加蒸馏水浸泡30min，微沸煎煮30min，过滤后滤渣再次煎煮，合并滤液旋蒸浓缩定容至200ml。

给药干预：莱菔子水煎液组按9g·kg⁻¹·d⁻¹生药量灌胃，模型组与对照组给予等体积蒸馏水，连续给药6周。

血压测量：采用IITC MRBP 10通道大小鼠尾血压测量仪，每周测量大鼠尾动脉血压1次，连续6周，每次测量3次取平均值。

样品制备：给药6周后采集新鲜粪便，-80℃保存；粪便样本加2-氯苯丙氨酸甲醇溶液研磨、超声、离心，取上清过滤后用LC-MS检测。

检测条件：采用超高效液相色谱仪配合Q Exactive质谱仪，正负离子电离模式，设置对应色谱梯度与质谱参数进行检测。

数据处理：原始数据经格式转换、峰识别等处理后，进行PCA、OPLS-DA多元统计分析，筛选VIP>1.0的潜在差异离子，结合数据库鉴定差异代谢物，富集分析相关代谢通路。

实验结论

1.莱菔子水煎液对自发性高血压大鼠具有明显降血压作用（P<0.05），干预6周后降压效果明确。

2.莱菔子水煎液可调节SHR粪便中17种差异代谢物水平，包括亚油酸、尿香草苦杏仁酸、鹅去氧胆酸等。

3.莱菔子降压作用与6条关键代谢通路密切相关，分别为亚油酸代谢、苯丙氨酸代谢、卟啉与叶绿素代谢、花生四烯酸代谢、赖氨酸的降解、嘧啶的代谢。

4.莱菔子可能通过调节脂质代谢、能量代谢及血管舒张相关代谢物，发挥降低血压的药理效应。

参考文献

1.赵建敏.莱菔子治疗高血压病70例临床观察[J].河北中医药学报,1999,14(3):13.

2.李铁云,李天国,张国侠,等.莱菔子水溶性生物碱对自发高血压大鼠降压作用的实验研究[J].世界中西医结合杂志,2007,2(1):25.

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